1. Introdução

Reação imunológica: resposta a uma agressão exógena ou endógena para manter o equilíbrio homeostático; envolve órgãos, tecidos, componentes celulares e componentes solúveis (humorais). Para eliminar o agente agressor (microrganismo, transplante ou tumor) o sistema imunitário precisa de distinguir o self do non-self.

Inata vs Adaptativa

Memória inata treinada: memória não específica de longo prazo — as células inatas ficam mais eficazes após um estímulo inicial (reprogramação epigenética e metabólica). ≈ mémoire innée entraînée.

2. Macrófagos

Fagocitose (4 passos): A) adesão → B) ingestão → C) fusão fago-lisossómica → D) morte do microrganismo.

Evasão do patogénio: (1) evitar a fagocitose — toxinas, cápsula, evitar opsonização; (2) evitar a morte pós-fagocitose — escapar do fagossoma e replicar-se, inibir a fusão fago-lisossómica (ex. M. tuberculosis).

Morte por mecanismos dependentes/independentes de O₂ (respiratory burst → ROS). Recetor Fc reconhece anticorpos que opsonizam. Limpeza de células mortas → promove reparação tecidular e angiogénese (M1 inibição / M2 promoção).

Após reconhecimento, secreta citoquinas (IL-1, IL-6, TNF-α, IFN), proteínas do complemento e mediadores inflamatórios (NAP, PGE, ICAM). É também APC.

3. Neutrófilos

• Fagocitárias, produzidas e maturadas na medula óssea. Grânulos: lisozima, defensinas, MMP, catelicidinas.
• Funções: fagocitose, desgranulação (dégranulation), NETose.
• Ativados por quimiocinas, leucotrienos, C5a e C3a, e substâncias do patogénio. Quimiotaxia via aderência ao endotélio (CAMs).
• Defensinas — disrupção da membrana (bactérias/fungos/vírus). Catelicidinas — toxicidade antimicrobiana direta + ativação leucocitária.
• NETs — cadeias de DNA e histonas com lisozima, elastases e defensinas.

Mecanismos antimicrobianos dos fagócitos

4. PRRs, PAMPs e DAMPs

PRRs reconhecem PAMPs; o dano tecidular gera DAMPs (moléculas endógenas de morte celular). Tipos: membranares (TLR) e secretados (pentraxinas, colectinas, ficolinas, proteínas do complemento).

TLR: porção extracelular com repetições de leucina + porção intracelular com domínio TIR. Cascata: reconhecimento → sinalização → NF-κB → citoquinas pró-inflamatórias, quimiocinas, IFN. Contribuem para a imunidade inata treinada.

5. Células dendríticas

Capturam ag, são APCs, migram após ativação, secretam citoquinas, mantêm tolerância periférica. As DC clássicas são as APC mais importantes para iniciar a adaptativa (ativam LT naive) e produzem IFN-I. As FDC (foliculares) exibem o antigénio aos linfócitos B.

6. Mastócitos, basófilos e eosinófilos

Mastócitos/basófilos (mucosas): alergias (recetor de IgE), vasodilatação/permeabilidade, defesa contra helmintas. Mastócitos libertam histamina, heparina, prostaglandinas, leucotrienos e enzimas proteolíticas. Eosinófilos (mucosas): moléculas citotóxicas MBP e EPX, citoquinas e fatores de crescimento.

7. Células NK e ILC

NK (origem linfoide) — citotóxicas por desgranulação (perforinas + granzimas, cálcio-dependente) e indução de apoptose; ativadas por IFN. ILC (“non-B non-T”, sem BCR/TCR): tecidos de barreira, plasticidade, resposta rápida a alarminas (IL-33), reparação.

ADCC — Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity

A NK reconhece uma célula-alvo revestida por IgG (através do seu recetor Fc) e destrói-a. É um processo de morte independente do MHC I — a NK não precisa de "ver" MHC para matar por esta via.

A NK elimina a célula-alvo por: (a) desgranulação — perforinas e granzimas, semelhantes às proteínas do complemento, formam poros na membrana do alvo (processo cálcio-dependente); (b) indução de apoptose pela ligação Fas-FasL.

8. Componentes solúveis

IFN-I (α, β): induz fagocitose e apoptose de células infetadas, enzimas que inibem a síntese proteica viral, e a resposta adaptativa; retém linfócitos nos gânglios, ↑ citotoxicidade NK/Tc, promove Th1, ↑ MHC I. PFAs — produzidas por hepatócitos em resposta a IL-6, IL-1, TNF-α; ativam complemento, opsonizam, limitam danos; PCR = marcador inflamatório.

9. Resposta inflamatória

Aguda (min/horas, dura 8–10 dias) → se persiste, crónica. Sinais: calor, rubor, dor, inchaço (edema) + vasodilatação, afluxo celular, ↑ permeabilidade. Migração: rolling (selectinas) → adesão (integrinas) → extravasão/diapedese. Citoquinas pró-inflamatórias: TNF, IL-1, IL-6 (locais/sistémicas; ex. sepsis).

10. Mecanismos que limitam a inata

IL-10, vias de sinalização negativas (SOCS) e autofagia (impede inflamassoma/ROS).

Definição: >30 proteínas solúveis, sintetizadas por hepatócitos e monócitos, no soro e fluidos tecidulares (exceto urina e CSF). Circulam inativas (zimogénios); a clivagem gera proteases que clivam a proteína seguinte. Nomenclatura: fragmentos por letras minúsculas; o “a” é o mais pequeno — exceção do C2a.

Funções gerais

• Lise (MAC)
• Opsonização → fagocitose
• Remoção de imunocomplexos (Ag–Ac)
• Amplificação da inflamação (C3a, C4a, C5a)

Resumo: C3a → inflamação · C3b → opsonização · C5a → inflamação + quimiotaxia · MAC → lise.

As 3 vias (convergem no MAC)

Clássica: C1 = C1qrs (1 C1q + 2 C1r + 2 C1s); cada C1q liga ≥2 Fc. A IgM pentamérica adota a conformação “grampo” ao ligar (circulante é plana); a IgG tem 1 Fc → precisa de 2 IgG. Alternativa: C3b é regulado no self pelos Fatores H e I; micróbios não têm reguladores → amplifica. Lectinas: MBL (PRR) + MASP-1/2 clivam C4 e C2.

MAC (terminal): C5b-C6-C7-C8-C9 → canal transmembranar → lise.

Deficiências no Complemento

Se os complexos antigénio-anticorpo (imunocomplexos) não forem removidos, podem depositar-se nos capilares, nomeadamente no glomérulo renal, causando dano tecidular → doença autoimune.

É por isso que um défice do complemento está na origem de doença por imunocomplexos.

Expansão clonal e tipos

Os clones de linfócitos maturam nos órgãos linfoides I sem antigénio; entram nos tecidos linfoides; são ativados pelo ag específico; ocorre a resposta. Humoral (B): micróbios extracelulares → secreção de anticorpos → bloqueia infeções e elimina extracelulares. Celular (T): ativa macrófagos (Th, CD4) e mata células infetadas (Tc, CD8).

Órgãos linfoides I (maturação)

• Timo — maturação T: precursores → timócitos; seleção positiva (reconhece fracamente MHC self → sobrevive) e seleção negativa (reconhece fortemente ag self → eliminado).
• Medula óssea — maturação B: as células B imaturas saem e terminam a maturação nos órgãos linfoides II (baço).

Órgãos linfoides II (ativação e diferenciação)

• Gânglios: B no folículo germinativo, T nas HEV. A segregação garante contacto: B com FDC, T com DC clássicas.
• Baço: filtra o sangue; proliferação e vigilância.
• MALT: amígdalas, GALT, BALT, NALT — IgA secretória, tolerância oral.
• TLO (terciários): agregados de células imunes em tecidos não linfoides por inflamação crónica ou tumor (ex. estroma peritumoral do cancro oral).

Circulação linfocitária e homing

Os naive vão dos I para os II; sem ag, recirculam (homing). Rolling: L-selectina ↔ PNAd. Adesão: integrina LFA-1. Quimiocinas CCL19/CCL21 ↔ CCR7 ativam a integrina. As efetoras vão para os tecidos; as memória para os órgãos II.

Fases da resposta · Antigénios

Fases: 1) reconhecimento · 2) ativação (expansão clonal) · 3) eliminação (efetora) · 4) contração (apoptose, homeostase) · 5) memória.

Antigénio = liga-se a anticorpo/TCR (nem todos ativam). A parte reconhecida = epitope. Imunogénico = estimula resposta. Só proteínas degradadas em péptidos são vistas pelo TCR. Haptenos = baixo peso molecular, não ativam T/B; tornam-se imunogénicos ligados a uma proteína carrier.

Reconhecimento: a Ig liga macromoléculas na forma nativa; o TCR liga complexos péptido-MHC (ag proteico transformado em péptidos).

Ativação

1. Sinal 1 — reconhecimento: TCR ↔ péptido-MHC na APC.
2. Sinal 2 — coestimulação: CD28 (T) ↔ B7-1/B7-2 (CD80/86) na APC ativada. Sem coestimulação → a célula morre/anergia.
3. Sinal 3 — citoquinas: secreção de IL-2 (ativação autócrina).

Recetores inibidores da família CD28: CTLA-4 (liga B7 no lugar do CD28) e PD-1. CD40L-CD40: o T “licencia” a DC (↑B7, citoquinas) — feedback positivo que amplifica a ativação T.

Diferenciação Th

Superantigénios (SE, TSST): ligam diretamente MHC II + TCR sem transformação antigénica → ativam muitas T → tempestade de citoquinas.

Linfócitos Tc (CD8) e reguladores

Tc/CTL (CD8-MHC I): sinapse → exocitose de grânulos → morte. Vias: perforina/granzima (poro → granzima → apoptose) e Fas/FasL. Produzem também IFN-γ. A ativação total de CD8 naive pode exigir ajuda de CD4 (citoquinas + licenciamento de DC). Exaustão (infeções crónicas): ↓IFN-γ, ↑PD-1.

Treg: FoxP3, CD25 (+CTLA-4); suprimem linfócitos autorreativos/efetores (competem por IL-2; TGF-β/IL-10/IL-35). NKT: reconhecem lípidos em moléculas CD1; produzem IL-4/IFN-γ.

Sinapse imunológica

Zona de contacto organizada entre o linfócito T e a APC/célula-alvo. Nota importante do curso: a ligação dos péptidos ao TCR é mais fraca do que a ligação dos péptidos aos anticorpos — daí a necessidade dos correcetores (CD4/CD8) e das integrinas (LFA-1) para estabilizar o contacto.

Como as Treg suprimem (mecanismos)

• Competem pela IL-2 — usam o CD25 (IL-2R) para "roubar" a IL-2 às células efetoras;
• Secreção de citoquinas inibitórias: TGF-β, IL-10 e IL-35;
• Citólise das células T efetoras;
• Supressão indireta por inibição das APCs;
• Perturbação metabólica das células efetoras (AMP cíclico, adenosina/recetor A2A);
• Libertação de vesículas (EVs) com miRNAs/proteínas que inibem as DC e as T efetoras.

Treg e cancro: a infiltração por Treg favorece a progressão tumoral (inibe a ativação das T contra o tumor → menor resposta imune). Paradoxalmente, muitas Treg FoxP3+ associam-se a melhor sobrevida no cancro colorretal, esofágico e da cabeça/pescoço, mas a pior prognóstico na mama, melanoma e estômago.

APCs (para que resposta)

• DC → ativa T naive (início da adaptativa).
• Macrófago → resposta T efetora → ativação macrofágica.
• Célula B → resposta T efetora → produção de anticorpos.

Ativação (T-dependente)

Corecetor B = CD19/CD21/CD81. Passos: 1) ag liga o BCR (cross-link); 2) ↑MHC II e B7; 3) endocitose e degradação em péptidos; 4) apresenta péptido-MHC II à Th; 5) Th ativa e expressa CD40L ↔ CD40; 6) B expressa recetores de citoquinas; 7) citoquinas da Th atuam na B. O BCR sozinho é insuficiente — precisa de complemento, PRR e Th.

Subpopulações

Linfócitos B reguladores (Breg)

Originam-se de células B-1 ou B-2 após ativação em ambientes inflamatórios. Produzem sobretudo IL-10, IL-35 e TGF-β para suprimir respostas imunitárias excessivas.

Respondem a vários sinais pró-inflamatórios: estimulação do BCR, TLRs, CD40L e CD80/CD86. Suprimem a imunidade celular via IL-10, IL-35, TGF-β, granzima B e moléculas imunomoduladoras (PD-L1, CD1d, Lag-3).

Diferenciação e supressão

Maturação de afinidade (↑ afinidade dos Ac). Switch isotípico (commutation de classe) — depende das citoquinas da Th e de CD40L-CD40, que induz a enzima AID. Síndrome Hiper-IgM: mutação em CD40L ou AID → sem switch → ↑IgM, IgG/IgA/IgE ausentes. Supressão: feedback por anticorpos via recetor inibidor FcγRIIB (CD32).

Anticorpos

Funções: neutralização, opsonização, ADCC, fagocitose com complemento, inflamação, lise. IgG (80% do soro, monomérica, 4 subclasses), IgA (secreções, dímero, transcitose), IgE (helmintas/alergia). Estrutura: 2 cadeias pesadas (H) + 2 leves (L); regiões variável/constante; 3 CDRs hipervariáveis contactam o ag. Fab (variável, liga ag) / Fc (constante, função efetora) / região charneira. Diversidade: V(D)J, flexibilidade juncional, nucleótidos N/P, maturação de afinidade + switch.

Moléculas solúveis de baixo peso molecular, produzidas sobretudo por Th e macrófagos; meia-vida curta, ação local e limitada; ligam recetores específicos. Autócrina (IL-2), parácrina (IL-4, IL-5), endócrina (IL-6, TNF-α). Podem ser pleiotrópicas, sinérgicas, antagonistas, redundantes ou em cascata.

4 classes

• I — fatores de crescimento / hematopoietinas
• II — interferões
• III — fatores de necrose tumoral
• IV — quimiocinas

Fatores de crescimento (estroma/macrófagos): proliferação/maturação de precursores → reposição de leucócitos. Quimiocinas (CXC e CC): ↑ aderência ao endotélio, migração para a infeção, desenvolvimento dos órgãos linfoides, migração das DC.

Na imunidade inata

TNF, IL-1, IL-6 (pró-inflamatórias); IFN-I (antiviral); IL-10 (inibe MO/DC — feedback negativo). Os IFN-I retêm linfócitos nos gânglios, ↑ citotoxicidade NK/Tc, promovem Th1, ↑ MHC I, e induzem enzimas que bloqueiam a replicação viral.

Estimulação da adaptativa

2 sinais: ag + moléculas da resposta inata (coestimuladores, citoquinas, complemento) → proliferação/diferenciação. Polarização Th: indução → commitment → amplificação (citoquinas das APC/NK/mastócitos).

Citoquinas inibidoras das Treg

TGF-β: inibe proliferação/função de T e macrófagos, regula a polarização Th, promove switch para IgA, repara tecidos. IL-10: inibe IL-12 das DC/MO e a expressão de coestimulação/MHC II.

Os genes MHC I e II codificam proteínas que apresentam antigénios aos linfócitos T. O MHC humano (HLA) está no cromossoma 6, com expressão codominante. Classe I: HLA-A, -B, -C — em quase todas as células nucleadas → apresenta a CD8+. Classe II: HLA-DP, -DQ, -DR — só em DC, MO, células B → apresenta a CD4+. A expressão ↑ com IFN (I com α/β/γ; II depende de IFN-γ).

Estrutura

Reconhecimento MHC-independente

Algumas populações T reconhecem antigénios não proteicos sem envolvimento de MHC I ou II: as NKT e as T γδ.

• NKT — têm marcadores das NK e dos linfócitos T; reconhecem lípidos e glicolípidos apresentados pela molécula MHC não clássica de tipo I: o CD1.
• T γδ — ativam-se de forma MHC-independente perante vários sinais.

Relevância clínica do MHC/HLA

O MHC/HLA é determinante em: transplantes (compatibilidade e rejeição), autoimunidade (associação a HLA), cancro (perda de MHC I = escape) e infeções.

Ativa: administração de ag (modificado)/toxina → produção ativa de imunidade + memória. Passiva: soro com anticorpos preformados → ação rápida, sem memória, proteção temporária.

Tipos de vacinas: vivas atenuadas/inativadas, mortas (imunidade humoral), subunidades/toxoides, conjugadas (LPS/polissacárido + proteína carrier), ag sintéticos. Adjuvante = ↑ imunogenicidade.

Passiva útil em: imunodeficientes, doença já presente, pós-exposição (ex. antiveneno).

Adjuvantes (imunização ativa)

Adjuvante = carrier imunogénico ou substância que prolonga a biodisponibilidade do antigénio e ativa o sistema imunitário, aumentando a imunogenicidade e gerando memória.

Imunoestimulantes: sais de alumínio, emulsões óleo-água (O/A), MPL, CpG, virossomas.

Nota do curso: em 2008 foi introduzida a vacina contra o HPV (jovens mulheres).

Tipo I — as 2 fases (nomes exatos)

1) Fase de sensibilização (1ª exposição, assintomática): Th2/TFh + IL-4 → switch B para IgE → IgE liga-se ao FcεRI à superfície dos mastócitos.
2) Fase efetora (reexposição): cross-link do FcεRI → desgranulação → mediadores lipídicos/aminas vasoativas = reação imediata (minutos); citoquinas libertadas = fase tardia (2–4 h, recrutamento de eosinófilos).

Tipo II (citotóxica): IgM/IgG contra antigénios de superfície → (a) opsonização e fagocitose; (b) inflamação mediada por complemento e recetor Fc; (c) disfunção do recetor sem lesão celular. Anemia hemolítica do RN (Rh): IgG maternos anti-D atravessam a placenta → ativam o complemento → hemólise; previne-se com IgRh. Outros exemplos: febre reumática (mimetismo molecular) e miastenia gravis (Ac anti-recetor de acetilcolina).

Combate tumoral

NK (mata células sem MHC I — missing self), CTL CD8 (perforina/granzima), macrófagos, ADCC (NK + IgG), Th1 (IFN-γ). Cross-priming das DC ativa os CTL contra ag tumorais.

Escape tumoral

• Perda/↓ de MHC I (escapa aos CTL)
• Perda/variação de ag tumorais
• Citoquinas imunossupressoras (TGF-β, IL-10)
• Recrutamento de Treg; PD-L1
• Ausência de coestimulação → anergia

Transplantes

Rejeição crónica: lesão progressiva (meses/anos) por aloanticorpos + T contra o endotélio (aloantigénios HLA) → vasculopatia/fibrose → isquemia. GVHD: os T do enxerto (dador) reconhecem o HLA do recetor como estranho e atacam-no (transplante de medula em imunodeprimido).

Célula redonda Tc (CD8+) a contactar uma célula-alvo.

Moléculas a legendar: TCR (cadeias α/β), CD8, CD3, CD28, LFA-1, FasL.

Efetores: perforina + granzima (grânulos libertados na sinapse) e IFN-γ.

Do lado do alvo: MHC I + péptido, e Fas.

Forma em Y: 2 cadeias pesadas (H) + 2 cadeias leves (L), unidas por pontes dissulfeto.

• Fab (braços) — região variável, liga o antigénio, contém os CDR.
• Fc (pé) — região constante, função efetora (liga recetores Fc e complemento).
• Região charneira — flexibilidade.

Ag → BCR (cross-link) → a B endocita e apresenta péptido-MHC II à Th.

Sinais: CD40-CD40L + B7-CD28 + citoquinas da Th.

→ proliferação → plasmócitos (anticorpos) + células B memória.

Th + APC, mas o sinal inibidor ganha:

• CTLA-4 (na T) liga o B7 no lugar do CD28;
• e/ou ausência do 2º sinal → anergia;
• PD-1 ↔ PD-L1;
• uma Treg a libertar TGF-β / IL-10.

Mãe Rh− sensibilizada → IgG anti-D → atravessam a placenta → ligam-se aos eritrócitos fetais Rh+ → ativam o complemento (complexo C1 → MAC) → hemólise / lise celular.

Legenda: placenta · antigénios Rh+ · IgG materna · complexo C1 · lise.

NK (mata as que perdem MHC I — missing self) · CTL CD8 (perforina/granzima) · macrófagos · ADCC (NK + IgG) · Th1 (IFN-γ).

Cross-priming: a DC apresenta o péptido tumoral em MHC I ao TCR do CTL → o CTL mata a célula tumoral.

• A = lise da célula infetada por NK/CTL (perforina/granzima, IFN-I).
• B = apresentação em MHC I ao CTL.
• C = macrófago/DC (APC): TLR → NF-κB → TNF/IL-1/IL-12.
• D = diferenciação Th0 → Th1/Th2.
• E = plasmócito a produzir IgA/IgG/IgM.

2ª doença autoimune mais comum (depois da AR). Afeta as glândulas exócrinas → xeroftalmia + xerostomia. Primário (isolado) ou secundário (com outra DA). Imunologia: ANA, anti-SS, anti-Ro; infiltrado TCD4+ e B nas glândulas salivares/lacrimais (↑ volume); citoquinas Th1 (IL-1, IL-6, TNF-α); saliva alterada (↓ mucinas, histatinas, lisozima, IgA — falência dos ácinos).

Oral: cáries, disfagia/BMS/alterações de gosto e fonação, gengivite/periodontite, candidíase/queilite angular, possível evolução maligna (linfoma).

Autoimune crónica inflamatória das articulações: autoanticorpos circulantes, ↑ imunocomplexos, citoquinas/quimiocinas → sinovite e comorbilidades ósseas/vasculares.

Oral: destruição da ATM (erosão óssea, deformação dos côndilos, ↓ espaço articular → dor/estalido), hiposalivação/xerostomia (>50%), predisposição a doença periodontal (fator comum: tabaco).

Autoimune crónica: articulações, rins, pele, vasos; fadiga, eritema, febre, fotossensibilidade. ANA em >95% dos doentes.

Oral: ~¼ com úlceras orais rodeadas de eritema, lesões labiais/mucosas, xerostomia, mais doença periodontal.

Doença bolhosa autoimune (pele/mucosas): autoanticorpos IgG anti-desmogleínas 1 e 3 → perda de adesão entre queratinócitos (acantólise); as células T também têm papel. No pênfigo vulgar as bolhas começam nas mucosas (boca).

Oral: úlceras dolorosas com sangramento, bolhas, BMS, gengivite descamativa, sinal de Nikolsky positivo.

Crohn (DC) e Colite ulcerativa (CU): resposta imune inapropriada às bactérias comensais (via IL-23, ↓ regulação, barreira defeituosa). Oral (Crohn, pode preceder): inchaço labial, queilite angular, mucosa em “cobblestone”, úlceras aftosas. CU: úlceras orais, Pyostomatitis vegetans.

Dermatose crónica mucocutânea. Reação dirigida a antigénio → ativação de T efetores: eixo Th1/Th17 (IFN-γ, IL-17); os CD8+ (Tc1/Tc17) lesam o epitélio por Fas-FasL, TNF-α e sobretudo exocitose de grânulos (perforina, granzima B, granulisina) → apoptose dos queratinócitos. DC, macrófagos e NK também participam. Infiltrado rico em TCD8+ (potencial maligno).